محیط مانیتول سالت آگار تک خانه زیست رویش Zist Royesh Mannitol Salt Agar (MSA) 8cm

مانیتول سالت آگار

به عنوان محیط کشت انتخابی برای جداسازی استافیلوکوک های بیماری زا از نمونه های کلینیکی و غیر کلینیکی به کار می رود. محیط کشت مانیتول سالت آگار حاوی غلظت بالایی از نمک است. در نتیجه مناسب برای تشخیص باکتری هاییست که در محیط هایی با غلظت زیاد نمک، زندگی می کنند. باکتری استافیلوکوکوس اورئوس می تواند در غلظت های بالای نمک زنده بماند و این محیط کشت بسیار مناسب برای تشخیص این نوع باکتری است.

مانیتول سالت آگار یک محیط کشت مهم در آزمایشگاه های تشخیص طبی محسوب می شود زیرا باعث مشخص شدن میکروب های پاتوژنیک در یک دوره کوتاه از زمان می شود. این محیط رشد گروهی از باکتری های خاص را تشویق می کند در حالی که از رشد دیگران جلوگیری می کند.

استافیلوکوک ها به طور گسترده در طبیعت پراکنده اند. اما بیشتر بر روی پوست و غده های پوستی و غشای موکوسی پستانداران و پرندگان یافت می شوند. گونه های کوآگولاز مثبت مثل استافیلوکوکوس اورئوس به خوبی به عنوان بیماریزاهای فرصت طلب انسانی شناخته می شوند.

استافیلوک توانایی منحصر به فردی در رشد روی محیط های با مقدار نمک بالا دارد. پس جداسازی استافیلوکوک های کوآگولاز مثبت روی محیط کشت مانیتول آگار فنول رد با ۷٫۵% NaCl صورت می گیرد.

ویژگی ها

• درصد بالاتر نمک در مقایسه با سایر محیط های کشت
• محیط کشت انتخابی-افتراقی
• باکتری هایی می توانند دراین محیطی رشد کنند که اولا مانیتول را تخمیر نمایند و ثانیا در مقابل غلظت زیاد نمک طعام مقاوم باشند.

کاربردهای محیط کشت مانیتول سالت آگار

• برای جداسازی انتخابی و تمایز استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های بالینی
• برای شمارش استافیلوکوک در مواد غذایی و لبنیات استفاده می شود.
• در راهنمای تجزیه و تحلیل باکتری برای آزمایش مواد آرایشی
• در معاینه باکتریایی آب استخر شنا ، آبگرم و آب آشامیدنی با استفاده از فیلتراسیون غشایی

ترکیبات محیط کشت Mannitol Salt Agar :

• عصاره گوشت گاو
• پپتون پروتئاز
• HM پپتون
• سدیم کلرید
• D-مانیتول
• فنول رد
• آگار

PH نهایی در دمای ۲۵ درجه سانتی گراد،حدود ۷٫۴ می باشد.

• عصاره گوشت گاو و پروتئاز پپتون فاکتورهای اصلی برای رشد را فراهم می کند. (مواد مغذی مانند نیتروژن، ویتامین ها، مواد معدنی و اسیدهای آمینه ضروری برای رشد).
• این محیط حاوی 7.5٪ غلظت کلرید سدیم است که منجر به مهار نسبی یا کامل ارگانیسم های موجود در بدن به غیر از استافیلوکوک می شود. کلرید سدیم همچنین الکترولیت های ضروری را برای انتقال و تعادل اسمزی تأمین می کند.
• مانیتول منبع کربوهیدرات قابل تخمیر است که تخمیر آن منجر به تولید اسید می شود. استافیلوکوکوس اورئوس روی این محیط رشد کرده و مانیتول را تخمیر کرده و کلنی های زرد تولید می کند. بیشتر گونه های منفی کوآگولاز استافیلوکوک ها و میکروکوک ها مانیتول را تخمیر نمی کنند و به صورت کلنی های کوچک قرمز رشد می کنند.
•  فنول رد به عنوان معرف pH به محیط کشت افزوده شده است. در محیط مانیتول سالت آگار وجود قند مانیتول و معرف قرمز فنل باعث می شود که اگر باکتری استافیلوکوک طلایی باشد کلنی هایی به رنگ زرد با هاله زردرنگ به وجود آید در صورتی که سایر استافیلوکوک ها معمولا کلنی های کوچکتر و قرمز با منطقه بنفش رنگ ایجاد می کنند.
• اکثر گونه های کواگولاز منفی استافیلوکوک ها و میکروکوکس ها مانیتول را تخمیر نمی کنند و به صورت کلنی های قرمز کوچک رشد می کنند. رنگ کلنی ها و محیط به دلیل واکنش پذیری فنل قرمز به pH محیط است. فنل قرمز در pH 8.4 قرمز و قرمز فنل در pH 6.8 زرد است.

محدودیت های آزمایش

چندین گونه استافیلوکوک غیر از aureus مانیتول مثبت هستند و کلنی های زرد احاطه شده توسط مناطق زرد را در این محیط تولید می کنند. (به عنوان مثال S. capitis ، S. xylosus ، S. cohnii ، S. sciuri ، S. simulans و سایر گونه ها). بنابراین ، آزمایش های بیوشیمیایی بیشتری برای شناسایی S. aureus یا سایر گونه ها لازم است.

بیشتر ارگانیسم ها به غیر از استافیلوکوک ها به دلیل برخی از موجودات دریایی هالوفیلیک، توسط غلظت بالای نمک موجود در این محیط مهار می شوند. چند سویه استافیلوکوکوس اورئوس ممکن است تخمیر با تأخیر مانیتول را نشان دهند. قبل از دور انداختن، پلیت های منفی باید یک شب دوباره انکوباسیون شوند و استافیلوکوکوس اورئوس فرضی باید با آزمایش کوآگولاز (با پلاسمای خرگوش) تأیید شود.