محیط اکسیداتیو-تخمیری (OF) لوله ای زیست رویش Zist Royesh oxidative fermentative (OF) Tube 16x100mm

محیط کشت OF – oxidative-fermentative

اکسیداتیو یا تخمیری بودن یک موجود زنده را می توان با استفاده از محیط Hugh and Leifson که معمولاً محیط OF نامیده می شود و حاوی تریپتون و بروموتیمول بلو (یک شاخص) است، تعیین کرد. یکی از قندها مانند گلوکز، زایلوز، مانیتول، لاکتوز، ساکارز و مالتوز به محیطی که به عنوان کربوهیدرات قابل تخمیر عمل می کند، اضافه می شود.

روش انجام تست OF

باکتری به دو لوله از هر محیط OF تلقیح می شود. برای انجام تست OF دو لوله از محیط OF برداشته می شود و بانیدل باکتری در لوله ها کشت داده می شود. باکتری را در این محیط باید به میزان زیاد کشت داد. پس از تلقیح، یک لوله با روغن معدنی یا پارافین ذوب شده پوشانده می شود که یک محیط بی هوازی ایجاد می کند. لوله دیگر به هوا باز می ماند. رشد میکروارگانیسم ها در این محیط یا با استفاده از تریپتون است که منجر به واکنش قلیایی (رنگ آبی تیره) می شود یا با استفاده از گلوکز که منجر به تولید اسید می شود (بروموتیمول آبی به زرد می شود). در واقع اگر باکتری از قند گلوکز تولید اسید کند، محیط OF از رنگ سبز به رنگ زرد تغییر رنگ میدهد. اگر باکتری بی هوازی اختیاری باشد، باید در هر دو لوله تغییر رنگ ایجاد شود. ولی اگر هوازی باشد، فقط در لوله فاقد روغن تغییر رنگ ایجاد می کند.

باکتری های ساکارولیتیک گلوکز را تخمیر یا اکسید می کنند. باکتری های تخمیر کننده در محیط، اسید تولید می کنند. اسید تولید شده باعث زرد شدن شناساگر بروموتیمول آبی رنگ می شود.

ارگانیسم های آسکارولیتیک در هیچ یک از لوله ها اسید تولید نمی کنند.

محتویات محیط کشت OF

• پپتون
• کلرید سدیم
• دی پتاسیم فسفات
• گلوکز (دکستروز)
• بروموتیمول آبی
• آگار

نتایج:

مثبت: مثبت بودن تست استفاده از کربوهیدرات با ایجاد رنگ زرد در محیط نشان داده می شود.

• اکسیداتیو: ایجاد رنگ زرد فقط در لوله باز.
• تخمیری: ایجاد رنگ زرد در لوله های باز و بسته.

منفی: تست مصرف کربوهیدرات منفی با عدم وجود رنگ زرد نشان داده می شود (مدیا سبز باقی می ماند یا آبی می شود).

• غیر اکسید کننده/غیر تخمیرکننده

کنترل تخمیری: اشرشیاکلی

کنترل اکسیدایزر: سودوموناس آئروژینوزا

کنترل خنثی: آلکالیژنز

دکستروز (گلوکز) مهم ترین کربوهیدرات برای استفاده در OF Basal Medium است. اگرچه بعضی از ارگانیسم هایی که قادر به مصرف دکستروز نیستند ممکن است کربوهیدرات های دیگری را متابولیزه کنند. به همین دلیل لوله های کشت محتوی لاکتوز، مالتوز، ساکارز، مانیتول یا گزیلول نیز تهیه می شوند.