محیط کشت هکتون انتریک آگار (HEA) توسط سیلویا کینگ و ویلیام I. متزگر در سال 1968 معرفی شد.
هکتون انتریک آگار یک نوع محیط کشت انتخابی و افتراقی است که جهت جداسازی گونه های شیگلا و سالمونلا از نمونه های بیمار بکار می رود. در شیکاگو آنها برای افزایش ترمیم سالمونلا و شیگلا از نمونه های بالینی، محیط کشت HE Agar را هنگام کار در انستیتوی هکتون فرموله کردند.
محیط کشت HE Agar دارای غلظت های بالایی از املاح صفراوی است که از رشد باکتری های گرم مثبت ممانعت می کند. در این محیط کشت می توان به صورت مستقیم و یا غیر مستقیم، پاتوژن های دستگاه گوارش را جداسازی و کشت داد.
معمولا برای کشت نمونه ی مدفوع از محیط هکتون آگار استفاده می شود. محیط SS یا سالمونلا شیگلا نیز کاربرد مشابه این محیط دارد.
استفاده قطعی از محیط کشت HE برای تمایز بین شیگلا و سالمونلا است. اما بسیاری از گونه های دیگر هم ممکن است در این محیط رشد کنند. و این آزمایش در بین آنها تبعیض قائل نیست.
اکنون محیط کشت HE Agar به عنوان یک محیط کشت مستقیم و غیرمستقیم به منظور جداسازی و کشت پاتوژن های دستگاه گوارش مانند سالمونلا و شیگلا از آب، مواد غذایی و نمونه های مدفوع مشکوک به این ارگانیسم ها بکار می رود. این محیط کشت سبب مهار بیشتر ارگانیسم های غیر بیماری زا (فلور طبیعی) و کمک به رشد انتخابی سالمونلا و شیگلا از مدفوع می شود.
Hektoen Enteric Agar
ترکیبات محیط :
- پپتون پروتئاز
- عصاره مخمر
- ساکارز
- لاکتوز
- سالیسین
- نمک بایل
- سدیم کلرید
- سدیم تیو سولفات
- آمونیوم فریک سیترات
- فوشین اسیدی
- بروموتیمول بلو
- آگار
Ph نهایی باید حدود ۷٫۵ باشد (در دمای ۲۵ درجه سانتی گراد). محیط کشت HE حاوی شاخص های تخمیر لاکتوز و تولید سولفید هیدروژن و همچنین مهار کننده ها برای مهار رشد باکتری های گرم مثبت است.
دو رنگ بروموتیمول آبی و اسید فوشین به محیط هکتون اضافه می شود؛ که دارای سمیت کمتری نسبت به سایر رنگ هاست. حضور نمک های صفراوی و رنگ ها، از رشد ارگانیسم های گرم مثبت جلوگیری می کند.
فقط باکتری های میله ای گرم منفی بر روی HE agar رشد می کند. اندیکاتور محیط تیمول بلو می باشد که در هنگام کاهش pH به رنگ زرد در می آید. سدیم تیوسولفات منبع دسولفور محیط است.
نتیجه آزمایش:
در محیط HE، باکتری های لاکتوز مثبت به رنگ نارنجی مشخص می شوند. کلنی های سالمونلا نیز به رنگ سبز آبی با مرکز سیاه مشاهده می شوند.
رنگ سیاه به دلیل تولید گاز H2S توسط برخی از باکتری های گرم منفی مانند سالمونلا برروی هکتون انتریک آگار بخاطر اضافه شدن تیوسولفات و آمونیوم سیترات آهن به ترکیبات آن است.
کلنی های شیگلا نیز مانند سالمونلا بوده با این تفاوت که مرکز آنها به دلیل عدم توانایی در تولید گاز H2S سیاه نمی شود.
نقد و بررسی‌ها
پاکسازی فیلترهنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.