محیط سوربیتول مک کانکی آگار زیست رویش Zist Royesh Sorbitol MacConkey Agar (sMAC) 6cm

سوربیتول مک کانکی آگار – MacConkey Sorbitol Agar

MacConkey Sorbitol Agar بر اساس فرمول تهیه شده توسط Rappaport و Henigh است و یک محیط انتخابی و افتراقی برای تشخیص سروتیپ اشرشیاکلی O157:H7 غیر تخمیرکننده سوربیتول مرتبط با کولیت هموراژیک است. (سروتیپ E. coli O157:H7 یک پاتوژن انسانی مرتبط با کولیت هموراژیک است که از اثر سم شیگا مانند (SLT) ایجاد می شود).

در MacConkey Agar که حاوی لاکتوز می باشد، این سویه از دیگر E. coliهای تخمیر کننده لاکتوز قابل تشخیص نیست.

بر خلاف بیشتر سویه های ای کلای، E. coli O157:H  ، سوربیتول را به آرامی یا اصلا تخمیر نمی کند. بنابراین، MacConkey آگار با سوربیتول امکان شناسایی E. coli O157:H7 در کشت های مدفوع را فراهم می کند.

در این محیط با افزودن سفیکسیم و تلوریت یک محیط انتخابی و متمایزتر تهیه می شود که برای مهار پروتئوس میرابیلیس، سویه های غیر O157 E. coli و دیگر سویه های غیر تخمیرکننده سوربیتول استفاده می شود.

ترکیبات محیط سوربیتول مک کانکی آگار:

• پپتون
• پروتئوز پپتون
• D-Sorbitol
• کلرید سدیم
• مخلوط نمک صفرا
• قرمز خنثی
• کریستال ویولت
• آگار

pH نهایی 7.1 +/- 0.2 در 25 درجه سانتیگراد

پپتون و پپتون پروتئوز مواد مغذی لازم مانند ترکیبات نیتروژنی و کربن دار، اسیدهای آمینه با زنجیره بلند، مواد معدنی، ویتامین ها و مواد کمیاب برای رشد ارگانیسم ها را تامین می کنند.

کریستال ویولت موجود در محیط از رشد باکتری های گرم مثبت به ویژه انتروکوک ها و استافیلوکوک ها جلوگیری می کند.

کلرید سدیم تعادل اسمزی را حفظ می کند.

نوترال رد یک اندیکاتور است.

D-Sorbitol یک کربوهیدرات قابل تخمیر است.

نتیجه و تفسیر سوربیتول مک کانکی آگار

تمایز میکروارگانیسم های روده ای با ترکیب سوربیتول و نشانگر قرمز خنثی به دست می آید. رشد E.coli O157:H7 بر روی MacConkey Agar با سوربیتول، کلنی های بی رنگ و بیشتر فلور مدفوعی سوربیتول را تخمیر می کند و صورتی به نظر می رسد. بسته به توانایی در تخمیر سوربیتول، کلنی های بی رنگ یا صورتی تا قرمز تولید می شوند.

• تخمیر کننده سوربیتول: کلنی های صورتی تا قرمز، برخی از آنها توسط مناطق صفراوی رسوبی احاطه شده اند.
• غیر تخمیر کننده سوربیتول: کلنی های بی رنگ.

موارد استفاده از Sorbitol MacConkey Agar

برای جداسازی و تشخیص اشریشیا کلی O157: H7 مرتبط با کولیت هموراژیک (HC) و سندرم اورمیک همولیتیک (HUS) استفاده می‌شود.. این به تمایز E. coli O157: H7 از سایر سویه ها، به ویژه تخمیر کننده لاکتوز E. coli کمک می کند.

محدودیت های سوربیتول مک کانکی آگار

• گزارش شده است که برخی از انتروباکتریاسه ها و سودوموناس آئروژینوزا در MacConkey Agar هنگامی که در یک فضای غنی شده با CO2 انکوبه می شوند، مهار می شوند.
• انکوباسیون طولانی مدت کشت ممکن است باعث شود که کلنی های سروتیپ O157:H7 E. coli ظاهر بی رنگ مشخص خود را از دست بدهند و همچنین رنگ کلنی های مثبت سوربیتول می تواند محو شود و تشخیص آنها از کلنی های سوربیتول منفی دشوار باشد.
• انکوباسیون طولانی مدت می تواند منجر به محو شدن کلنی های صورتی رنگ مثبت سوربیتول شود که تفسیر را دشوارتر می کند. پس از انکوباسیون طولانی مدت، برخی از سویه های E. coli O157:H7 می توانند سوربیتول را تخمیر کنند و کلونی هایی به رنگ صورتی تولید کنند.
• گونه های دیگری از باسیل های گرم منفی بی هوازی اختیاری وجود دارند که سوربیتول را تخمیر نمی کنند
• اگرچه اکثر باکتری های غیر O157:H7 سوربیتول را تخمیر می کنند، حدود 6 درصد از سویه ها این کار را نمی کنند. این سویه های غیر معمول همراه با سایر باکتری های غیر تخمیری سوربیتول مانند مورگانلا و هافنیا با کلنی های O157:H7 یکسان به نظر می رسند و بنابراین ممکن است آزمایش های تاییدی لازم باشد.
• سویه های سوربیتول منفی سروتیپ های دیگری غیر از O157:H7 وجود دارد که ممکن است سموم و علائم بالینی ایجاد کند یا نداشته باشد. MacConkey Sorbitol Agar بین سویه های تولید کننده سم و غیر تولید کننده E. coli O157 تفاوتی قائل نمی شود.
• با این حال، MacConkey Sorbitol Agar نباید صرفاً برای یافتن سویه های بیماری زا E.coli O157: H7 را استفاده شود زیرا برخی از سویه های غیر سمی سوربیتول را تخمیر نمی کنند. رنگ آمیزی گرم، آزمایش های بیوشیمیایی و روش های سرولوژیکی باید برای تایید یافته ها انجام شود.