کیت رنگ آمیزی زیل نلسون 4 ویال بهار افشان Bahar Afshan Ziehl-Neelsen stain Kit 400ml

رنگ آمیزی زیل نلسون

متداول ترین روش رنگ امیزی برای شناسایی باکتری‌های اسید فست در زیر میکروسکوپ، به‌ویژه اعضای جنس مایکوباکتریوم استفاده می‌شود و به عنوان رنگ آمیزی اسید فست نیز شناخته می شود.

این روش رنگ آمیزی ابتدا توسط پل ارلیش (1854-1915) معرفی شد و متعاقباً توسط باکتری شناسان آلمانی فرانتس زیل (1859-1926) و فردریش نیلسن (1854-1898) در اواخر قرن نوزدهم اصلاح شد.

ارگانیسم های مایکوباکتریوم و نوکاردیا به دلیل داشتن مقدار زیادی لیپید و اسید مایکولیک در دیواره خود با رنگ آمیزی گرم به سختی به صورت گرم مثبت ظاهر شده و یا رنگ نمی‌گیرند.

از آنجا که مایکوباکتریوم با قرار گیری در معرض محلول های اسیدی رنگ را درون خود حفظ میکنند، آن را در دسته باکتری های اسید فست قرار میدهند.

از این باکتری‌ها مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (عامل سل) و مایکوباکتریوم لپره (عامل جذام) از همه معروف تر هستند. این باکتری ها توسط رنگ آمیزی گرم رنگ نمی‌گیرند.

مراحل رنگ آمیزی:

برای رنگ آمیزی زیل نلسون از سه محلول فوشین بازی، اسید الکل برای رنگ بری و متیلن بلو استفاده می کنیم.

بعد از فیکس کردن نمونه، روی لام را با رنگ کربول فوشین آغشته می کنیم . با استفاده از پنبه اغشته با الکل سطح زیری لام را حرارت میدهیم .

حرارت تا زمانی ادامه پیدا می کند که بخار از روی لام متصاعد شود. بعد از حرارت لام را به مدت 5دقیقه در هوای آزاد قرار میدهیم. در این مرحله تمام آرتیفکت ها ، باسیل ها و سایر مواد موجود در لام رنگ امیزی می شوند .

از آنجا که دیواره این ارگانیسم ها بسیار لیپیدی است، بنابراین رنگ نمیتواند وارد دیواره باسیل شود. با حرارت نفوذ رنگ به داخل باسیل ها را افزایش می دهیم . بعد از 5دقیقه، با آب معمولی لام را شستشو و آب گیری می کنیم.  سپس با اسید الکل رنگ بری را انجام می دهیم.

بعد از این مرحله در اتمام برای افزایش کنتراست از یک رنگ زمینه ای مانند متیلن بلو و یا مالاشیت گرین استفاده می کنیم. مدت زمان لازم برای متیلین بلو 1 دقیقه است. در مرحله آخر هم لام را خشک کرده و در زیر میکروسکوپ با عدسی 100 بررسی می کنیم .

باکتری اسید فست به رنگ قرمز روشن و زمینه آبی کمرنگ میشود.